（一）嚴格遵守操作規程
1、先將指甲修剪干凈，防止指甲損傷直腸。
2、用千分之一高錳酸鉀溶液消毒手指、手臂并均勻涂抹肥皂水或凡士林。五指并攏成錐形，緩慢插入肛門口，如牛肛門關閉較緊時，先用手指觸摸母牛尾根下后海穴處，或用并攏的手指錐形端放在肛門口前后刺激3～5次，母牛自然放松肛門口或排糞，即可伸手入肛門。
3、初次進行人工授精的母牛，易產生強烈的應激反應，保定難度大。要講究保定方法，既要安全又要牢固，以免損傷直腸和生殖器。
4、直腸檢查時，母牛往往用力努責，企圖推出術者手臂，當母牛努責，直腸被緊拉，感覺到腸內很空蕩，此時術者應用手背敲擊直腸壁或停止尋找子宮，將五指并攏停留在直腸內片刻或先將手取出，待母牛直腸努責消退后，再次尋找子宮口、頸體或卵巢等。禁止在直腸內亂抓、亂摸，動作不能過大，不能隨意將五指張開，應保持半握或并攏，以免引起直腸應激或損傷。
（二）直腸檢查判斷，適時輸精
1、先掏出糞便或讓母牛自動排出，排盡后將手臂沿著子宮頸成弧形緩慢往下找到子宮角，然后往左或右尋找卵巢，將左右卵巢進行對比，判斷卵巢濾泡發育程度。
2、將發育卵巢輕輕夾在中指和無名指中間，用大拇指和中指輕輕觸摸卵巢尋找發育的濾泡，并判定濾泡的柔軟程度及濾泡液充盈度。濾泡發育的判定方法。（1）觸摸較柔軟，表面潤滑、皮層勻稱、偏大、有波動感者為有濾泡的卵巢，反之，則為沒有濾泡的卵巢。（2）母牛兩側卵巢均發育，濾泡很小。（3）當濾泡表面柔軟與實質相間、光滑時為一期發育卵泡。（4）當卵巢表面有突出部分（一般指頭大小），而且更為柔軟光滑、皮質開始變薄的為二期發育卵泡，此時離排卵期6～8小時。（5）當卵泡表現突起，皮變薄、變軟，有液體，輕輕觸摸時感覺好像稍微用力壓就會立即破裂的為三期濾泡，也是配種的最佳時間。此時不能用力按壓卵泡，否則稍有不慎就會壓破。（6）如果發現母牛排出的粘液帶血跡，證明已排卵。或用手觸摸卵巢，發現某個部位出現凹狀，表明已排卵。如果能感覺并判定排卵未完成或正在排卵的可以進行追配。
（三）輸精過程要做到無菌操作
用千分之一的高錳酸鉀溶液清洗母牛外陰并用于凈毛巾輕輕擦拭，一只手從肛門伸入到子宮頸口處，另一只手握住裝好精液的輸精槍柄（不能握槍頭或槍體），輸精槍要求裝有一次性輸精槍外套，避免將污物帶入母牛的子宮造成人為的污染，影響受胎率。
（四）異常情況的處理
有子宮炎、子宮異常或因先天性子宮發育不良、子宮內壁粘連的母牛不宜配種。濾泡液干、少，濾泡發育差的母牛，少配或不配。
1、有子宮炎的母牛，用青霉素240萬單位、鏈霉素100萬單位，通過輸精管注入子宮進行治療。
2、對于發情母牛子宮體粗大、堅實但卵泡發育良好的，應在配種前4～6小時，先用輸精槍將青霉素240萬單位、鏈霉素100萬單位注入子宮內，凈化子宮內環境，提高配種受胎率。
1、先將指甲修剪干凈，防止指甲損傷直腸。
2、用千分之一高錳酸鉀溶液消毒手指、手臂并均勻涂抹肥皂水或凡士林。五指并攏成錐形，緩慢插入肛門口，如牛肛門關閉較緊時，先用手指觸摸母牛尾根下后海穴處，或用并攏的手指錐形端放在肛門口前后刺激3～5次，母牛自然放松肛門口或排糞，即可伸手入肛門。
3、初次進行人工授精的母牛，易產生強烈的應激反應，保定難度大。要講究保定方法，既要安全又要牢固，以免損傷直腸和生殖器。
4、直腸檢查時，母牛往往用力努責，企圖推出術者手臂，當母牛努責，直腸被緊拉，感覺到腸內很空蕩，此時術者應用手背敲擊直腸壁或停止尋找子宮，將五指并攏停留在直腸內片刻或先將手取出，待母牛直腸努責消退后，再次尋找子宮口、頸體或卵巢等。禁止在直腸內亂抓、亂摸，動作不能過大，不能隨意將五指張開，應保持半握或并攏，以免引起直腸應激或損傷。
（二）直腸檢查判斷，適時輸精
1、先掏出糞便或讓母牛自動排出，排盡后將手臂沿著子宮頸成弧形緩慢往下找到子宮角，然后往左或右尋找卵巢，將左右卵巢進行對比，判斷卵巢濾泡發育程度。
2、將發育卵巢輕輕夾在中指和無名指中間，用大拇指和中指輕輕觸摸卵巢尋找發育的濾泡，并判定濾泡的柔軟程度及濾泡液充盈度。濾泡發育的判定方法。（1）觸摸較柔軟，表面潤滑、皮層勻稱、偏大、有波動感者為有濾泡的卵巢，反之，則為沒有濾泡的卵巢。（2）母牛兩側卵巢均發育，濾泡很小。（3）當濾泡表面柔軟與實質相間、光滑時為一期發育卵泡。（4）當卵巢表面有突出部分（一般指頭大小），而且更為柔軟光滑、皮質開始變薄的為二期發育卵泡，此時離排卵期6～8小時。（5）當卵泡表現突起，皮變薄、變軟，有液體，輕輕觸摸時感覺好像稍微用力壓就會立即破裂的為三期濾泡，也是配種的最佳時間。此時不能用力按壓卵泡，否則稍有不慎就會壓破。（6）如果發現母牛排出的粘液帶血跡，證明已排卵。或用手觸摸卵巢，發現某個部位出現凹狀，表明已排卵。如果能感覺并判定排卵未完成或正在排卵的可以進行追配。
（三）輸精過程要做到無菌操作
用千分之一的高錳酸鉀溶液清洗母牛外陰并用于凈毛巾輕輕擦拭，一只手從肛門伸入到子宮頸口處，另一只手握住裝好精液的輸精槍柄（不能握槍頭或槍體），輸精槍要求裝有一次性輸精槍外套，避免將污物帶入母牛的子宮造成人為的污染，影響受胎率。
（四）異常情況的處理
有子宮炎、子宮異常或因先天性子宮發育不良、子宮內壁粘連的母牛不宜配種。濾泡液干、少，濾泡發育差的母牛，少配或不配。
1、有子宮炎的母牛，用青霉素240萬單位、鏈霉素100萬單位，通過輸精管注入子宮進行治療。
2、對于發情母牛子宮體粗大、堅實但卵泡發育良好的，應在配種前4～6小時，先用輸精槍將青霉素240萬單位、鏈霉素100萬單位注入子宮內，凈化子宮內環境，提高配種受胎率。
