用流產胎兒胃內容物或陰道分泌物等材料制成菲薄的涂片，干燥、火焰固定后，用沙黃一孔雀綠染色法染色，布魯氏菌被染成淡紅色、小球狀桿菌，其他細菌或細胞為綠色或藍色。也可觀察其培養特性。
小動物感染試驗：應用豚鼠接種分離的布魯氏菌，比用培養基分離可靠，因病料內細菌不多時，用培養基分離培養常不能生長。正式試驗時，取子宮分泌物、乳汁流產胎兒胃內容物、羊水、精液或病變組織，制成混懸液等，給2只體重350 - 400g的豚鼠皮下或腹腔接種，一般為0.5-1.0 - 2.0mL，接種后第2周開始采血，以后，每隔7-10d采血1次，檢查血清抗體，如凝集價達1:5以上時，即認為是陽性反應，證明已感染了布魯氏菌，此時，可從豚鼠心血中分離培養細菌，即使分離不到細菌，也可判為已感染布魯氏菌。通常一只在接種后第三周剖殺，另一只在第6周剖殺，如見到鼠蹊淋巴結與腰下淋巴結腫大，脾腫大、表面粗糙，有結節狀病灶，肝臟有灰白色細小平坦的壞死小結節，更可進一步證實試驗的陽性結果；若注射的豚鼠不發病，剖檢無病變，臟器分離培養陰性，可報告陰性。如為公豚鼠，腹腔接種時，可引起睪丸炎。如在接種后第3個月末，豚鼠不發病，未死亡，血清反應仍陰性，可報告為陰性。
（二）血清學試驗
1．凝集反應 動物感染布魯氏菌的4-5d后，血液中即出現凝集素，隨后凝集滴度逐漸增高，能持續1-2年或更久，以試管凝集反應檢查時，豬在1:50達“++”或“++"以上者，判為陽性反應，在1: 25達“++”時為疑似反應。大群檢疫時，為提高效率，可用玻板凝集反應，豬血清在0.04mL處凝集，判為陽性反應；在0.08mL處凝集時，判為疑似反應。
判為可疑的豬，3-4周后應采血重檢，如仍為可疑反應。可按以下情況來確定，即該群中既無本病的流行病情況發生，也無臨床病例出現，血檢也無陽性時，則可判為陰性反應。
2．虎紅平板凝集反應 虎紅布魯氏菌有色抗原呈酸性，且具有緩沖作用，并能抑制引起非特異性反應的IgM的活性和增強特異性IgG的活性，使反應的敏感性提高，特異性優于常規試管凝集反應。檢驗時，取被檢血清與虎紅抗原各0.03mL，滴加于平板上混勻，放置4 - 10min觀察結果二只要有凝集現象出現，即可判為陽性反應。
3．其他方法‘熒光抗體染色法、間接炭凝集反應、間接紅細胞凝集反應、協同凝集試驗、特異性花結吸附染色、酶標SPA染色、二巰基乙醇（2-ME）凝集反應、補體結合反應、細胞免疫檢查法、乳汁環狀反應、熱凝集反應、凝膠電泳法等均可用于布魯氏菌病的診斷。閻守敦等(1990)應用凝膠電泳法來鑒別布氏桿菌的人工感染和疫苗接種。近年來，間接血凝試驗、抗球蛋白(Coombs)試驗、酶聯免疫吸附試驗(ELISA)、熒光抗體法、DNA探針以及聚合酶鏈式反應(PCR)等新的方法逐漸被用于本病診斷或檢疫。
